Síndrome de Turner: variaciones en la constitución cromosómica y sus efectos en la expresión fenotípica / Turner Syndrome: variations in the chromosomal constitution and its effects on the phenotypic expression

El Síndrome de Turner es un desorden cromosómico causado por haploinsuficiencia completa o parcial de uno de los cromosomas sexuales. Incidencia 1: 2500 recién nacidas vivas. Clínicamente las pacientes presentan talla baja, un espectro amplio de anomalías somáticas y disgenesia gonadal. Desde el año 1968 hasta el presente se estudiaron clínica y citogenéticamente 630 niñas con fenotipo de Turner, sin ambigüedad genital y con cariotipos anormales, quienes consultaron en la División de Endocrinología del Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez". Se realizó cariotipo en sangre, al inicio con metodología estándar, luego con diferentes bandeos convencionales y de alta resolución. En casos especiales se aplicó la técnica FISH y el análisis molecular de los cromosomas X e Y. El número de metafases analizadas también varió con el tiempo, permitiendo evidenciar más de una línea celular. En casos de alta sospecha clínica, la lectura de 100 metafases permitió poner en evidencia mosaicismos bajos conteniendo la línea 45,X. En nuestra serie la monosomía de cromosoma sexual 45, X fue la más frecuente siguiendo los mosaicos numéricos y estructurales de uno de los cromosomas sexuales. Los diferentes hallazgos cromosómicos nos han permitido establecer una correlación fenotipo-cariotipo en regiones específicas de los cromosomas sexuales

Turner Syndrome is a common chromosomal disorder caused by total or partial haploinsufficiency of one of the sex chromosomes. Incidence: 1: 2500. Clinically is characterized by short stature, several typical somatic features, and gonadal dysgenesis. This is a retrospective study involving 630 girls with Turner phenotype and abnormal karyotype, evaluated at the Endocrinology Division of Children´s Hospital "Ricardo Gutiérrez" between 1968 and 2018. The karyotype was done in leucocytes from peripheral blood and the metaphases were analyzed at the beginning with standard methodology and then with different banding techniques, standard and high resolution. In special cases, the FISH technique and the molecular analysis of the X and Y chromosomes were applied. The number of metaphases analyzed also changed with time, allowing the finding of more than one cellular line. In cases where the clinical suspicion was strong, the analysis of 100 metaphases allowed us to put in evidence low mosaicisms containing the 45,X line. In our study the monosomy of sexual chromosome 45, X was the most frequent following the numerical and structural mosaics of one of the sex chromosomes. The different chromosomal constitutions have contributed to establish in our patients phenotype-karyotype correlation with specific regions of the sex chromosomes

Bases moleculares de alfa-talasemia en la Argentina

La α-talasemia, es uno de los desórdenes hereditarios más frecuentes mundialmente. Al presente, el diagnóstico molecular es la única herramienta que permite el diagnóstico certero. El propósito de este trabajo fue caracterizar las bases moleculares de estos síndromes en nuestro medio, y establecer relaciones genotipo-fenotipo. Mediante la complementación de distintas técnicas de biología molecular e hibridación fluorescente in situ (FISH), se logró poner en evidencia la presencia de mutaciones α-talasémicas en 145 de 184 (78.8%) pacientes estudiados con perfil hematológico compatible con α-talasemia. Dentro de este grupo, las deleciones correspondieron al defecto genético más frecuente, prevaleciendo la mutación -α3.7 en genotipos heterocigotas y homocigotas. Asimismo, en pacientes con fenotipo α0 las deleciones prevalentes fueron -MED y -CAL/CAMP. Este estudio permitió también describir una deleción de la región sub-telomérica en un paciente con α-talasemia y retraso mental. En el 7.6% de los pacientes caracterizados clínicamente como posibles α-talasémicos (microcitosis con valores de Hb A2 inferiores al 3.5%), se hallaron mutaciones β-talasémicas en estado heterocigota. Se lograron establecer perfiles hematológicos asociados a los genotipos α+ y α0 para pacientes adultos y niños. Esperamos que este trabajo pueda servir como guía para reconocer posibles portadores α-talasémicos. También permite destacar el trabajo en conjunto de médicos hematólogos, el laboratorio (bioquímico y de biología molecular) y de los médicos genetistas, con el fin de proporcionar adecuado consejo genético.

The α-thalassemia is one of the most common hereditary disorders worldwide. Currently, molecular diagnostics is the only available tool to achieve an accurate diagnosis. The purpose of this study was to characterize the molecular bases of these syndromes in our environment and to establish genotype-phenotype associations. Through a combination of different molecular techniques and fluorescent in situ hybridization (FISH),we were able to find α-thalassemic mutations in 145 of the 184 patients (78.8%) studied with hematological parameters compatible with α-thalassemia. Deletions of the a-globin genes resulted the major molecular cause of the disease, and the most frequent mutation was -α3.7, found in homozygous and heterozygous genotypes. In patients with α0 phenotypes, other prevalent mutations were -MED and -CAL/CAMP. The description of a sub-telomeric deletion in a patient with α-thalassemia and mental retardation was also achieved. β-thalassemic mutations in heterozygous state were found in 7.6% of the patients, who presented α-thalassemic clinical features (microcytosis and Hb A2 levels below 3.5%). Hematologic profiles for the α+ and α0 genotypes were established for adult and pediatric patients. Hopefully, this work will provide guidelines for the detection of possible α-thalassemic carriers. It also highlights the collaborative work of hematologists, the biochemical and molecular biology laboratory and genetists, in order to provide appropriate genetic counseling.

Patogenesis molecular del carcinoma de esofago / Molecular pathogenesis of carcinoma of the esophagus

El carcinoma de esófago existe en dos formas principales: el carcinoma de células escamosas o pavimentoso y el adenocarcinoma. En este artículo se describen las principales alteraciones genéticas halladas en ambos tipos de carcinomas y la implicancia de éstas en la patogénesis de los mismos. La secuencia de estas alteraciones se correlaciona con la histogénesis, lo que permite comprender la progresión tumoral desde el epitelio normal al carcinoma invasor. Se establece también una comparación entre la patogénesis molecular delcáncer de esófago y del desarrollo de estos carcinomas con el modelo de la patogénesis molecular del cáncer colorrectal.

Metodologías diagnósticas y análisis molecular en el estudio de la infección por Helicobacter PYLORI / Diagnostic methodologies and molecular analysis in Helicobacter Pylori infection study

La infección por Helicobacter pylori (H. pylori) está asociada a enfermedades inflamatorias gastroduodenales y a neoplasias gástricas como adenocarcinomas y linfomas MALT. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las distintas metodologías diagnósticas invasivas de esta infección en relación con los resultados obtenidos por biología molecular. Se estudiaron biopsias de mucosa antral de 39 pacientes con patologías gastroduodenales endoscópica e histológicamente confirmadas, sin antibiotecoterapia en curso. Del directo de biopsia se realizaron estudios citológicos, histológicos, coloración de Gram y test rápido de ureasa. El estudio microbiológico incluyó: cultivo en Agar Base Columbia, en Agar Skirrow (AS), coloración de Gram y tipificación bioquímica (test de ureasa, catalasa y oxidasa). Se realizó técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para diagnóstico de H. pylori a partir de material de biopsia y cultivo. Los resultados positivos para H. pylori, en los directos de biopsias, fueron: a) citología 76,9 por ciento, b) histología 74,3 por ciento, c) coloración de Gram 87,1 por ciento, d) test de ureasa 38,5 por ciento, e) cultivo en ABC 35,9 por ciento y f) cultivo en AS 74,3 por ciento. En todos los casos el diagnóstico de H. pylori por PCR fue positivo. Los métodos directos (citología, histología y coloración de Gram) mostraron ser económicos, sensibles y con altos resultados coincidentes (94,9 por ciento). De los métodos indirectos, el test de ureasa mostró baja sensibilidad; se obtuvo un alto porcentaje de recuperación de colonias con el medio de cultivo selectivo de AS. El diagnóstico positivo de infección por H. pylori con 2 o más métodos fue posible en el 97,2 por ciento de los casos.

Importancia de la gonadectomía temprana en pacientes con síndrome de Turner portadoras de cromosoma Y / Importance of early gonadectomy in patients with Turner syndrome with presence of Y chromosome material

Introducción: la presencia de material del cromosoma Y en mujeres con Síndrome de Turner se asocia con el desarrollo de tumores gonadales, teniendo un incremento del riesgo relacionado con la edad. Objetivo: investigar la correlación entre la presencia de cromosoma Y ó secuencias específicas del Y y los hallazgos histopatológicos de las gónadas en pacientes con Síndrome de Turner. Material y métodos: se estudiaron cinco niñas con síndrome de Turner, con edades comprendidas entre los 4.4 y 13.4 años de edad. En todas las pacientes se realizó el análisis cromosómico con bandeo G y técnicas de alta resolución, tales como análisis molecular por PCR amplificando las secuencias específicas del cromosoma Y (SRT, DYZ1, DYZ3 y AMGL). Tres niñas tenían un cariotipo conteniendo el cromosoma Y, mientras que en las otras dos niñas restantes fueron detectadas secuencias del cromosoma Y por análisis molecular. En todas la niñas fue realizada la gonadectomía bilateral con técnica laparoscópica. Resultados: el procedimiento laparoscópico fue adecuado y bien tolerado por las niñas. Tres de las pacientes (de 5.4, 8 y 13.4 años de edad) que tenían cromosoma Y presentaron tumores gonadales: gonadoblastoma uni o bilateral, y en una de ellas se encontró un disgerminoma. En las dos niñas restantes se encontraron las típicas gónadas tipo "streak" del Síndrome de Turner, sin tejido neoplásico. Conclusión: el hallazgo de tumores gonadales en 3 de las 5 niñas con Síndrome de Turner refuerza la importancia de la indicación de la gonadectomía a edades tempranas cuando las pacientes son portadoras de material del Y en sus cromosomas. La técnica laparoscópica es una elección adecuada para el tratamiento

Análisis molecular del gen P53 y microsátelites en muestras endoscópicas de adenomas y carcinomas de colon / Molecular analysis of P53 gene and microsatellites in endoscopic samples of colonic adenomas and carcinomas

Uno de los eventos moleculares que participa en la secuencia adenoma-carcinoma colorrectal es la presencia de mutaciones en el antioncogen p53, cuyo producto proteico regula el ciclo celular. Asimismo, el análisis de microsatélites es un indicador indirecto de inestabilidad génica en tejido tumoral, permitiendo realizar un screening rápido de todo el genoma. En tejidos frescos y mucosa normal de ocho pacientes, se analizaron molecularmente por PCR-SSCP los exones 4 a 8 del gen p53 y microsatélites. Estos datos fueron correlacionados con el diagnóstico morfológico-inmunohistoquímico (IHQ). Fueron observadas alteraciones del gen p53 en el tejido tumoral en tres de ellos; se encontraron mutaciones puntuales en el exón 6 en dos pacientes: uno portador de un adenoma tubular y otro con un adenoma mixto (túbulo-velloso) ambos con displasia de alto grado y p53+IHQ tenía ua mutación en el exón 7. En un adenocarcinoma con sobreexpresión de p53 por IHQ no se detectaron alteraciones de dicho gen. La presencia de mutación sería un indicador de transformación tumoral y corroboraría el seguimiento más estricto en pacientes con lesiones de alto grado. El análisis de microsatélites en los 8 pacientes no determinó la existencia de anomalías génicas.

Absence of mutations in the P53 tumor suppressor gene in non-invasive Cushing adenomas

A lot of evidence supports the existence of a monoclonal origin for pituitary tumors, and several genetic alterations have already been confirmed as necessary or sufficient for unrestrained cellular growth and pituitary function. The p53 gene, a known tumor-suppressor gene (TSG), encodes a protein that exerts antiproliferative effects such as cell-growth arrest and apoptosis in response to several types of stimuli. In fact, several human cancers are believed to be caused by p53 mutations. In the case of pituitary tumors, p53 protein accumulation has been described in ACTH-secreting pituitary adenomas. Since increased amounts of the p53 protein are often related to mutations of its gene, we decided to explore the existence of p53 mutations in the tumor tissues of 9 patients bearing non-invasive corticotropinomas, excised by the transphenoidal route. We screened mutations in exons 5 to 8 of the p53 gene by the PCR-SSCP analysis. We were not able to find any mutation in the exons investigated. Our results are in close accordance with those obtained previously for other types of pituitary tumors.

El impacto de la genética molecular en la clínica médica / The impact of the molecular genetics in the medical clinic

El desarrollo de la biología molecular en los últimos veinte años, con la aplicación de la ingeniería genética permite actualmente diagnosticar las alteraciones moleculares de una serie de enfermedades hereditarias y demostrar la presencia de diferentes agentes infecciosos en los más variados fluidos orgánicos. La amplificación de fragmentos de ADN por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) hace posible diagnosticar con gran precisión y sensibilidad siendo su mayor utilidad la identificación de portadores sanos heterocigotas de enfermedades recesivas.

La determinación sexual a nivel molecular: implicancia en el diagnóstico de patologías gonadales / Molecular sex determination: significance in the diagnosis of gonadal pathologies

La diferenciación sexual representa una serie de fenómenos que participam en el establecimiento del dimorfismo sexual. Este proceso implica dos etapas: la determinación de sexo, es decir la orientación de la gónada primitiva que está gobernada por genes presentes en los cromosomas sexuales y Ia diferenciación sexual propiamente dicha que corresponde a la formación de los tractos genitales internos y externos, debido a la acción de factores hormonales secretados por la gónada fetal. En el hombre la determinación testicular está bajo el dominio del gen SRY, localizado en el brazo corto del Y (Ypl1.3). El marco de lectura abierto del gen codifica para una proteína de 220 aa que presenta un motivo de 80 aa muy conservados en la evolución (HMG box) confiriéndole a la proteína sus propiedades de unión al ADN. Recientemente, se ha aislado en Xp2l un locus llamado DSS (Dosage Sensítive Sex-Reversal), cuya doble dosis inhibiría la determinación testicular en fetos 46,XY a pesar de un gen SRY funcional y a su vez podría estar implicado en la determinación ovárica. Además, se ha demostrado que la expresión del gen SRY activa un camino regulatorio que lleva a la expresión del gen MIS (Mullerian lnhibiting Substance). Finalmente, el empleo de las técnicas de genética molecular ha permitido el análisis de estos genes en pacientes con disgenesia gonadal. La información resultante, en combinación con datos fenotípicos y citogenéticos ha permitido establecer correlaciones de valor diagnóstico.